تهیه سازه rnai اختصاصی بذر برای ژن های رمزگردان آلفا زئین 19-kda ذرت

thesis
abstract

وجود سازه اختصاصی بذر برای تغییر ژنتیکی پروفایل پروتئین های ذخیره ای دانه ذرت از مهمترین نیازهاست که در این تحقیق هدف گیری شده است. پروتئین های ذخیره ای غالب دانه ذرت، یعنی زئین ها که60% پروتئین های ذخیره ای دانه ذرت را تشکیل می دهند ، از نظر محتوای اسیدآمینه های ضروری مانند لیزین و تریپتوفان دارای کمبود هستند که این امر منجر به کیفیت غذائی پائین دانه ذرت می شود. از طریق شناسایی موتانت ها یا دستکاری های ژنتیکی انجام شده، نشان داده شده است، دانه هایی که میزان پروتئین های زئین آنها کاهش یافته، میزان کل اسیدآمینه های لیزین و تریپتوفان در آنها افزایش پیدا کرده است. زیرخانواده 19-kdaاز کلاس آلفا زئین 40% از کل پروتئین های زئین را تشکیل می دهد و تقریبا بصورت کامل از اسیدآمینه های لیزین و تریپتوفان تهی است. هدف از اجرای این تحقیق تولید سازه پلاسمیدی rnai (rna interference) اختصاصی بذر برای خاموشی ژن های مربوط به زیرخانواده 19-kdaاز کلاس آلفا زئین از طریق فناوری rnai می باشد تا از این طریق موجبات کاهش پروتئین های زئینی فقیر از اسیدآمینه های ضروری و به دنبال آن افزایش پلیوتروپیک پروتئین های غیر زئینی غنی از اسیدآمینه های لیزین فراهم گردد. بمنظور ساخت سازه مورد نظر، رشته همسو و ناهمسو ژن مورد نظر که هر دو تحت تنظیم یک راه انداز اختصاصی آندوسپرم بذر ذرت قرار دارند و توسط یک رشته غیر مشابه جدا می شوند در یک سازه با همدیگر همسانه سازی شدند. برای این کار در ابتدا قطعات مورد نظر شامل قطعه 19pro&s (رشته همسو حاوی راه انداز اختصاصی آندوسپرم بذر) و قطعه 19as (رشته ناهمسو) بوسیله واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر و پس از تایید اندازه آنها بوسیله الکتروفورز ژل آگارز، بصورت جداگانه در حامل همسانه سازیpgem-t شرکت promega همسانه-سازی شدند. سپس قطعه 19as که تا پیش از این در حامل یاد شده همسانه سازی شده بود با برش توسط آنزیم های برشی sac i و pst i از حامل خارج و پس از استخراج از ژل آگارز بوسیله کیت استخراج از ژل شرکت bioneer، در حامل همسانه سازی حاوی قطعه 19pro&s تهیه شده از قبل و در پایین دست این قطعه و بصورت ناهمسو با آن درج شد. بعد از رونویسی این توالی تشکیل یک مولکول rna دورشته ای سنجاق سری را می دهد که آغازگر فرایند rnai است. در طول ساخت سازه مورد نظر صحت قطعات با استفاده از توالی یابی تایید شدند. آنالیزهای مقایسه ای کاست ساخته شده با نتایج ثبت شده با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیکی انجام گرفت.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

جداسازی راه اندازهای اختصاصی ژن های زئین بذر ذرت

علیرغم اینکه همه سلول های یک موجود زنده دارای ژنوم یکسانی هستند، تمایز سلول ها، تشکیل بافتهای مختلف و تداوم عمل آنها نیازمند بیان اختصاصی برخی ژن ها در بافتها و شرایط مختلف است؛ راه اندازهای ژنی یکی از اصلی ترین وظایف را در این مورد برعهده دارند. با توجه به اهمیت ذرت به عنوان یک گیاه زراعی و یک گونه مدل مهم در مطالعات ژنتیکی، جداسازی بخش راه اندازی ژن های آلفا-زئین به عنوان راه اندازهای اختصاصی...

15 صفحه اول

تهیه وکتور rnai و آگرو باکتریوم اختصاصی برای تولید بذور ذرت حاوی فیتات کم

بذور غلات بخصوص ذرت به عنوان منبع تغذیه فسفر برای دام و طیور می باشد حال اینکه فسفر در دانه این گیاه بیشتر به شکل فیتات می باشد و توسط جانوران تک معده مانند: انسان، طیور و ماکیان تجزیه نمی شود و بیشتر فسفر تغذیه ای موجود در دانه از دسترس این جانوران خارج می گردد. راهکار های زیادی از سال 1992 برای کاهش فیتات دانه ها بخصوص ذرت انجام گرفته است. دانشمندان روش هایی مانند موتاسیون وگزینش در سطح رضایت...

15 صفحه اول

تهیه سازه اختصاصی بذر حاوی قطعات omega و sar به منظور افزایش بیان ژن در بذر گیاه

پایین­بودن سطح بیان ژن­ها، از مهم­ترین فاکتورهای محدودکننده تولید پروتئین­های نوترکیب در گیاهان می­باشد. انتخاب بافت مناسب گیاه جهت بیان و نیز بهبود تظاهر قطعه ژنی از جمله راه­های افزایش بیان ژن در گیاه می­باشند. در این پژوهش با طراحی و تهیه سازه اختصاصــــی بذر به­هــــمراه قطعـــات افزایـــنده بیــان ژن؛ omega(tobacco mosaic virus 5' –leader) و sar (scaffold attachment region) سعی شده است تا ...

full text

تهیه سازه rnai ژن های fatb و fad2 کلزا و انتقال آن به آگروباکتریوم

با توجه به یافته های جدید در زمینه اهمیت روغن در تغذیه انسان و نیز موارد صنعتی کاربرد آن، گیاهان روغنی به عنوان یکی از منابع عمده تامین کننده روغن، مورد توجه محققین قرار گرفته است. سطح زیر کشت کلزا به عنوان یک گیاه روغنی در کشور به ویژه در سال های اخیر در حال گسترش بوده است با توجه به این امر بهبود کیفیت روغن حاصل، از طرق مختلف از جمله دستکاری ژنتیکی گیاه، نیز بایستی مورد توجه قرار بگیرد. تحقیق...

15 صفحه اول

تهیه و آنالیز دینامیکی حرارتی نانوچندسازه‌های زئین، کیتوزان، نانوسلولز

یکی از مشکلات صنعت پلاستیک انباشت زیاد مواد و پلیمرهای سنتزی در محیط زیست است که می تواند به عنوان آلاینده مدت زیادی در طبیعت باقی بماند. دراین تحقیق پلیمرهای طبیعی با تولید نیمه صنعتی جایگزین پلیمرهای سنتزی می شوند. ابتدا مستربچ زئین، نانوسلولز و کیتوزان به نسبت 3:2:5 تهیه شد. محلولی از کیتوزان و زئین تهیه گردید. سپس به سوسپانسیون نانوسلولز افزوده شد تا مخلوط سه جزئی چندسازه تهیه شود. پس از خش...

full text

Lipoprotein Promotes Neutrophil Activation 19-kDa Mycobacterium tuberculosis

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده کشاورزی

Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023